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為您的熒光樣品創建光學切片——無雜散光。利用結構照明,可以簡單有效地消除非焦平麵雜散光,便於完全專注於科學研究。蔡司Apotome 3能夠識別放大倍率並將適當的柵格移至光路中。隨後,係統會從不同柵格位置的多幅圖像中計算出光學切片圖像。它是一種非常有效的消除非焦平麵雜散光的方法,同樣適用於比較厚的樣品。係統操作非常簡便。優質的光學切片——讓您獲得出色分辨率和高對比度圖像。
要對尺寸從幾百微米到幾納米範圍內的結構進行成像,通常需要不同放大倍數的物鏡。Apotome 3具有三種不同幾何形狀的柵格,可保證每一顆物鏡成像的高分辨率。您隻需要關注實驗本身,因為係統可自動選擇合適的柵格,時刻確保獲得高對比度的光學切片。與傳統寬場熒光顯微圖像相比,Apotome 3能夠顯著提高軸向分辨率:您可以獲得支持三維渲染的優質光學切片,厚的樣品也不例外。
實驗的複雜性和需求往往隨著時間發生變化。因此您的設備不僅需要注重性能,還應具有靈活性。將Apotome 3與傳統的金屬鹵化物燈、經濟型LED白光光源或柔光、多色Colibri照明係統結合使用。使用時僅需更換濾色片,係統便會自動將柵格移至正確位置。任何染料都不受技術上的製約:不論是DAPI、Alexa488、Rhodamin、Cy5還是活體染料,如GFP或mCherry——Apotome 3都能夠適應熒光和光源,生成您期望的優質清晰圖像。
憑借結構照明的特有算法,您甚至可以借助蔡司Apotome 3通過反卷積進一步改善圖像質量。在保留所有原始數據的同時,該係統還允許在寬場、光學切片以及反卷積的圖像之間切換,實現出色的靈活性和兼容性。反卷積算法快速、穩健且易於使用,能夠改善圖像的橫向和軸向分辨率。因對比度改善、光學分辨率更高且現有噪聲得到抑製,您可以更好地識別樣品更細微的結構。
您的相機能夠檢測到焦平麵以外的光。根據試樣的厚度和體積降低對比度和分辨率(圖A:通過傳統反射熒光照明法獲取圖像)。
蔡司Apotome 3可自動將匹配的柵格放入顯微鏡光路中,不受放大倍數的影響。減少不需要的背景熒光能夠增加柵格的頻率,使光學切片變得更薄。來自焦平麵以外的圖像信息則受到抑製(圖B、C和D),因此改善了光學切片的對比度和分辨率。示例(圖D)中,“低柵格”可優化切片厚度。此類圖像尤其適用於3D分析以及通過渲染軟件處理圖像數據。
蔡司Apotome 3將柵格結構投射到樣品的焦平麵,隨後使用掃描機構將其移至不同位置。Apotome 3在每一柵格位置都能夠自動獲取一張數字圖像。係統使用特有算法將所有的圖像處理成一個具有高對比度和分辨率的光學切片。產生的圖像無柵格結構。
熒光激發光會穿過Apotome 3載玻片中的兩塊玻璃板。當柵格結構應用於第一塊玻璃板時,柵格圖案會被投影激發光中。掃描組件機構會傾斜第二塊玻璃板,柵格圖像便在樣品的焦平麵內平移。
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